王磊,蔡丽萍
WANG Lei, CAI Liping.
摘要: 目的 研究柚皮苷对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞SKOV3/DDP体外增殖的影响及耐药逆转作用,并初步探讨相关耐药机制。方法采用MTT法测定DDP对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50),柚皮苷对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用及柚皮苷联合DDP对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制作用。筛选出非细胞毒性的柚皮苷浓度,将实验细胞分为空白对照组、2.5 μg/ml DDP组、10 μmol/L柚皮苷组、10 μmol/L柚皮苷联合2.5 μg/ml DDP组,分别采用RT-PCR和Western blotting测定各组作用48 h后耐药基因MDR1 mRNA及MRP2 mRNA的表达及其相应的表达产物P-gp、MRP2蛋白的表达水平。结果1~32 μg/ml DDP处理SKOV3及SKOV3/DDP细胞48 h后,SKOV3细胞的IC50为5.48 μg/ml,SKOV3/DDP细胞为14.93 μg/ml,耐药指数为2.72。柚皮苷对SKOV3/DDP细胞有明显的增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。选取10 μmol/L柚皮苷作为逆转耐药实验浓度,10 μmol/L柚皮苷联合DDP作用48 h后,SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药指数为1.62,逆转倍数为1.68。RT-PCR及Western blotting检测显示,柚皮苷联合DDP组与DDP单药组比较,MDR1 mRNA、MRP2 mRNA表达及P-gp、MRP2蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论柚皮苷对卵巢癌SKOV3/DDP细胞的体外增殖具有明显抑制作用,并能逆转SKOV3/DDP细胞的耐药性,其逆转耐药的机制可能与下调耐药基因MDR1 mRNA及MRP2 mRNA及相应的P-pg、MRP2蛋白的表达有关。
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