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高 鹏1,杨 朝1,张 洁2,张 超1,王 巍1,翟宏芳1,陈明达1,左 方3,王 炎4,杜家宜1,张立新1,李宏民1,孙国贵1
GAO Peng, YANG Zhao, ZHANG Jie, ZHANG Chao, WANG Wei, ZHAI Hongfang, CHEN Mingda, ZUO Fang, WANG Yan, DU Jiayi, ZHANG Lixin, LI Hongmin, SUN Guogui.
摘要: 目的 探讨微小RNA-769-5p (miR-769-5p) 在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)技术检测miR-769-5p 在5种NSCLC细胞(A549、NCI-H1299、NCI-H157、ANIP-973和GLC-82)中的相对表达量,选择相对表达量最低和最高的细胞株分别转染miR-769-5p mimics/miR-769-5p inhibitor,另设miRNA mimics control/inhibitor control对照组;采用MTS 实验、克隆形成实验及Transwell 小室实验检测miR-769-5p对NSCLC 细胞增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力的影响。结果 miR-769-5p在A549、NCI-H1299、NCI-H157、ANIP-973 及GLC-82细胞中的相对表达量分别为 0.06、0.40、0.09、1.04和2.31。在miR-769-5p表达水平最低的A549细胞中瞬时转染miR-769-5p mimics,在miR-769-5p表达水平最高的GLC-82细胞中瞬时转染miR-769-5p inhibitor。MTS结果显示,与对照组比较,miR-769-5p mimics 能够抑制A549细胞的增殖 (P<0.05),而miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的增殖 (P<0.05)。平板克隆实验结果显示,与对照组比较,miR-769-5p mimics 能够抑制A549细胞的平板克隆形成数 (124.7±14.7 vs. 399.4±46.0,P<0.05);而miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的平板克隆形成数 (555.7±29.7 vs. 366.3±28.7,P<0.05)。Transwell实验结果显示,与对照组迁移和侵袭跨膜细胞数比较,miR-769-5p mimics能够抑制A549细胞的迁移和侵袭 (94.4±18.1 vs. 157.8±22.9,84.4±15.1 vs. 135.6±16.7,P<0.05);miR-769-5p inhibitor能够促进GLC-82细胞的迁移和侵袭 (226.7±40.3 vs. 153.3±38.7,196.7±39.1 vs. 138.9±40.4,P<0.05)。结论 miR-769-5p可以抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移,可能成为NSCLC的潜在靶点。
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