临床肿瘤学杂志

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荧光定量PCR法检测MDM2T309G位点多态性

陈 红1,谢 丽1,2,胡文静1,2,禹立霞1,2,钱晓萍1,2,刘宝瑞1,2   

  1. 1 210008 南京 南京医科大学鼓楼临床医学院肿瘤中心 2 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心暨南京大学临床肿瘤研究所
  • 收稿日期:2010-12-27 修回日期:2011-03-06 出版日期:2011-07-31 发布日期:2011-07-31
  • 通讯作者: 刘宝瑞

  • Received:2010-12-27 Revised:2011-03-06 Online:2011-07-31 Published:2011-07-31

摘要: 目的 建立一种简便易行的MDM2基因单核苷酸多态性(SNP)309位点的检测方法。方法 用DNA提取试剂盒提取外周血DNA,建立MDM2SNP309位点荧光定量PCR熔解曲线检测法。应用煮沸法处理血样取得粗制DNA,行荧光定量PCR检测,建立位点特异引物法检测MDM2SNP309位点基因型。比较静置不同时间、反复冻融等处理以及存在血液学指标异常的血样经煮沸法提取DNA对荧光定量PCR扩增反应的影响,通过观察PCR扩增情况,评估不同处理方法对PCR扩增反应的影响。结果 荧光定量建立MDM2SNP309位点PCR检测方法。煮沸法提取的DNA可用于普通PCR、荧光定量PCR扩增体系,且煮沸法处理血样具有较广的适用范围。结论 采用MDM2基因SNP309位点特异性引物行荧光定量PCR检测法是一种简便易行的MDM2基因SNP309位点检测方法,该方法有较好的临床适用性。

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