方喜生,刘国龙,刘霞,吕琳
FANG Xisheng,LIU Guolong,LIU Xia,LV Lin.
摘要: 目的 探讨微小RNA-148b(miR-148b)在肺腺癌组织和细胞株中的表达及临床意义。
方法 采用实时定量PCR检测13例肺腺癌及癌旁组织中miR-148b的表达,并检测其在肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B和正常人肺上皮细胞株HBE中的表达,选取肺腺癌细胞株miR-148b表达水平最低者分别转染miR-148b模拟物(mimics)和miR-148b control。通过MTT检测、低密度细胞集落形成实验、Transwell实验检测miR-148b对细胞增殖、集落形成和侵袭能力的影响。结果 miR-148b在肺腺癌和癌旁组织中的相对表达量分别为0.61±0.42和0.91±0.32(P<0.05);与正常肺上皮细胞株HBE(相对表达量设为1.00)比较,4种肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B中miR-148b的表达量分别为0.42±0.08、0.38±0.02、0.29±0.03和0.21±0.04(P<0.05),选取PC14/B细胞株进行后续实验。MTT检测显示,实验第3天,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞吸光值明显低于转染miR-148b control组(P<0.05);低密度细胞集落形成实验中,与转染了miR-148b control的PC14/B细胞(相对克隆数设为100)相比,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞的相对克隆数为47±8,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验显示,转染miR-148b mimics后穿过基底膜的相对PC14/B细胞数为82±22,与miR-148b control组(200±34)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-148b在肺腺癌组织和细胞中表达下调,且可抑制肺腺癌PC14/B细胞株的增殖、集落形成和侵袭能力。
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