倪晓蓓,李欣,凌秀风,霍然
NI Xiaobei, LI Xin, LING Xiufeng, HUO Ran
摘要: 目的 探讨FAM21对人绒毛膜癌细胞系JEG-3迁移和侵袭功能的影响。方法 设计并合成2条FAM21特异性小分子干扰RNA(siRNA 1和siRNA 2)及1条随机序列siRNA(control siRNA),瞬时转染JEG-3细胞,依次设为siRNA1组、siRNA 2组和control siRNA组。同时选取未行转染的JEG-3细胞作空白对照(空白组)。普通PCR法检测正常胎盘滋养细胞株HTR-8/Sveno和JEG-3细胞中FAM21 mRNA水平。分别于转染后24、48h采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测各组FAM21的mRNA和蛋白水平,Transwell法检测各组转染24h后的细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测各组转染24h后的迁移侵袭相关基因(KISS1、BRMS1和INSL4)的mRNA水平。
结果 JEG-3细胞的FAM21 mRNA水平高于HTR-8/Svneo细胞(P<0.05)。siRNA 1组和siRNA 2组转染24h后的FAM21 mRNA和转染48h后的FAM21蛋白水平均低于control siRNA组和空白组(P<0.05),转染24h后的迁移和侵袭能力均低于control siRNA组和空白组(P<0.05)。siRNA 1组和siRNA 2组转染24h后的KISS-1和BRMS1 mRNA水平降低,而INSL4 mRNA水平升高,与其余两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);control siRNA组和空白组上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 FAM21在人绒毛膜癌JEG-3细胞中具有调节迁移和侵袭的功能,在绒毛膜癌的病理机制中发挥了重要的作用。
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