楚广民,张建波,孙淼淼
CHU Guangmin,ZHANG Jianbo,SUN Miaomiao
摘要: 目的 探讨小干扰RNA(siRNA)靶向代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及可能的机制。方法 采用靶向mGluR5表达的特异siRNA 转染卵巢癌SKOV3细胞(转染组),同时设置转染无义序列的阴性对照组。转染48 h,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测siRNA对mGluR5的沉默效果;采用CCK-8法、EdU细胞荧光染色实验、Hoechst 33342细胞染色实验、划痕实验检测沉默mGluR5表达后SKOV3细胞的活性、增殖、凋亡和迁移情况;采用Western blotting检测PTEN/Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果 QPCR检测显示,转染组中mGluR5 mRNA的表达水平降至(18.3±2.3)%,显著低于阴性对照组(P<0.05)。CCK-8法检测显示,转染72 h阴性对照组的吸光值为4.1±0.2,高于转染组的2.4±0.3(P<0.05)。EdU免疫荧光染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞增殖率为(22.4±2.3)%,高于转染组的(9.2±1.2)%(P<0.05)。Hoechst 33342细胞染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞凋亡率为(6.2±1.3)%,低于转染组的(28.2±2.2)%(P<0.05)。划痕实验显示,阴性对照组的相对划痕愈合比例为(100.0±2.1)%,显著高于转染组的(48.6±4.3)%(P<0.05)。Western blotting检测显示,转染组PTEN蛋白的表达增加,p-Akt蛋白的表达降低(P<0.05);而Akt蛋白无明显变化(P>0.05)。结论 沉默mGluR5表达能显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞迁移能力,该过程可能与激活PTEN/Akt信号通路有关。
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