临床肿瘤学杂志

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靶向SMC1A基因慢病毒介导的RNA干扰对奥沙利铂治疗敏感性的影响

冯婉婷1,2,喻晓娟1, 李进1,史玉叶1,曹维克1,邓之奎1,何敬东1   

  1. 1 223300 南京医科大学附属淮安第一人民医院肿瘤内科 2 210029 南京医科大学在读硕士研究生
  • 收稿日期:2011-11-22 修回日期:2011-12-09 出版日期:2012-05-31 发布日期:2012-05-31

  • Received:2011-11-22 Revised:2011-12-09 Online:2012-05-31 Published:2012-05-31

摘要: 目的 探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A(SMC1A)基因对奥沙利铂(L-OHP)敏感性的影响。方法 构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒。与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株。RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况。CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用。 结果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp。RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞(0.13±0.02 vs. 1.02±0.06,0.182±0.019 vs. 1.114±0.032;P<0.05);Western blotting 显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制;不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础。

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