陈淑如,黄宇康,吴楚成,陈迪,方勤,彭伟强
CHEN Shuru, HUANG Yukang, WU Chucheng, CHEN Di, FANG Qin, PENG Weiqiang.
摘要: 目的 探讨microRNA-155(miR-155)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及乳腺癌耐药相关蛋白表达的调控作用。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测MCF-7细胞和人乳腺正常上皮细胞中miR-155的表达水平。将MCF-7细胞分为4组:对照组、空转染组、抑制(转染miR-155 inhibitor)组和过表达(转染miR-155 mimics)组,采用qRT-PCR检测转染24、48、72及96 h后各组的转染效果,噻唑蓝(MTT)法检测各组转染24、48、72及96 h的增殖能力,采用流式细胞仪PI/Annexin V双染色法检测各组转染24、48 h后的凋亡率,Western blotting法检测各组转染48 h后乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-糖蛋白(P-gp)及多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达水平。结果 乳腺癌MCF-7细胞中的miR155水平高于人乳腺正常上皮细胞(P<0.05),且转染miR-155 inhibitor或mimics可呈时间依赖的方式降低或升高MCF-7细胞的miR-155水平(P<0.05)。与对照组相比,抑制组转染后的细胞增殖率及BCRP、P-gp和MRP1的表达水平均降低,凋亡率升高(P<0.05);而过表达组的细胞增殖率及BCRP、Pgp和MRP1的表达水平均升高,凋亡率降低(P<0.05)。结论 MCF-7细胞中miR-155呈高表达,下调miR-155表达可抑制其增殖及耐药相关蛋白的表达,同时诱导凋亡。
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