目的 探讨沉默FHL2表达对骨肉瘤U2OS细胞的增殖和凋亡的影响及其相关机制的研究。方法 通过构建FHL2的shRNA干扰载体pLKO.1，制备慢病毒并感染U2OS细胞，分为shFHL2目的基因干扰组（shFHL2）和无关序列对照组（SCR）；感染96 h后采用实时定量PCR（QPCR）和Western blotting检测两组FHL2 mRNA和蛋白水平。采用MTT方法检测细胞增殖，流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期的变化，Western blotting检测FHL2干扰后U2OS细胞相关信号通路的蛋白表达变化。利用双荧光素酶报告基因系统检测FHL2对p53下游基因转录调控的影响。结果与SCR组比较，shFHL2组感染96 h后FHL2 mRNA和蛋白水平均降低（P＜0.05）。shFHL2组感染24、48、72、96 h的细胞增殖比分别为1.73±0.08、2.49±0.38、3.26±0.45和4.28±0.29，其中96 h的细胞增殖比低于SCR组（P＜0.05）；shFHL2组感染96 h的细胞凋亡率为（17.55±1.05）％，高于SCR组的（7.73±1.12）％，差异有统计学意义（P＜0.05）；shFHL2组感染96 h的G0／G1期细胞为（68.18±0.78）％，高于SCR组的（59.73±2.28）％，差异有统计学意义（P＜0.05）。干扰FHL2表达能够显著上调p53、p21和Bax的表达水平并能增强p53对Bax启动子的促转录活性。结论 沉默FHL2表达可明显抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖并促进细胞凋亡，使细胞阻滞于G0／G1期；FHL2介导了p53对Bax启动子的转录调节作用。FHL2可能会成为新的肿瘤治疗靶点，其机制与p53／Bax和p53／p21通路相关。

目的 构建环氧化酶2（COX2）基因慢病毒表达载体并观察其对非小细胞肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响。方法 针对COX2基因的不同片段设计3对shRNA的寡核苷酸片段并克隆至慢病毒载体GV248中，构建并筛选最佳抑制效率的靶向COX2基因的慢病毒载体COX2shRNA。选取对数生长期A549细胞进行慢病毒转染，其中靶向COX2基因的shRNA载体转染A549细胞为shRNA组，以空载体质粒转染作为阴性对照组（NC）及不转染质粒的A549细胞为空白对照组（CON），采用实时荧光定量PCR和Western blotting测定COX2基因和蛋白的表达。分别采用MTT法和流式细胞仪检测干扰COX2表达对A549细胞增殖、凋亡能力的影响。结果 成功构建靶向COX2基因的慢病毒载体；稳定转染A549细胞后，COX2基因表达下降，其中以COX2shRNA1干扰效率最为显著；shRNA组中shRNA1转染的A549细胞COX2 mRNA水平为0.17±0.06，低于NC组的081±011和CON组的109±0.07，差异有统计学意义（P＜0.05）。shRNA组细胞增殖活性低于NC组和CON组，shRNA组转染5 d的吸光值为0.976±0.016，低于NC组的1.557±0.015和CON组的1880±0034，差异有统计学意义（P＜0.05）。shRNA组细胞凋亡率为（6.28±0.31）％，高于NC组的（3.08±0.05）％和CON组的（3.01±0.31）％，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 成功构建靶向COX2基因的慢病毒表达载体，干扰COX2表达可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖并促进细胞凋亡。

目的 探讨微小RNA3917（miR3917）对肺癌细胞增殖及对生物钟基因Period2（PER2）表达的影响。方法 取复苏后的肺腺癌A549细胞培养至对数生长期，采用脂质体法向A549细胞转染10、20、50 nmol／L靶向miR3917的 siRNA表达载体pEGFPmiR3917siRNA质粒，转染48 h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达；根据实验设计分为对照组、空载体组和干扰组，空载体组及干扰组的质粒浓度均为50 nmol／L，采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测转染48 h后的miR3917相对表达量，QPCR和Western blotting分别检测转染48 h后的PER2 mRNA和蛋白水平，采用CCK8法检测各组转染24、48、72 h的A549细胞增殖抑制率，双荧光素酶靶标实验验证miR3917与PER2的相互关系。结果 QPCR检测发现对照组、空载体组和干扰组的miR3917相对表达量依次为1007±0.018、1.068±0.084和0.171±0.052，干扰组的miR-3917相对表达量低于对照组和空载体组，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组、空载体组和干扰组的PER2 mRNA相对表达量依次为1060±0.129、1.086±0.229和2.920±0.927，蛋白表达量依次为0.204±0.046、0.183±0.043和0.512±0.117，干扰组的PER2 mRNA和蛋白水平均高于对照组和空载体组，差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组和空载体组比较，干扰组的A549细胞增殖能力下降，转染24、48、72 h后的增殖抑制率依次为（34.192±5.268）％、（33.527±6.603）％和（30.591±7.788）％，均高于其余两组，差异有统计学意义（P＜0.05）。miR3917可显著抑制野生型PER23’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性，而对突变型PER2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论 下调miR-3917可抑制肺癌细胞增殖并升高PER2水平，miR-3917对PER2有靶向调控作用，可作为肺癌防治的新靶点。

目的 探讨微小RNA216（miR-216）是否影响胰腺癌细胞增殖凋亡及对吉西他滨耐药。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）法检测胰腺癌吉西他滨耐药细胞株BxPC-3和非耐药株CFPAC-1中的miR-216表达水平；采用Lipofectamine 2000脂质体法将miR216模拟物（mimics组）及抑制剂（inhibitor组）分别转染BxPC3细胞，以进行脂质体转染的BxPC3细胞为对照组，采用QPCR检测转染48 h后各组miR216表达水平，CCK-8法检测转染24、48、72 h后各组吸光值以评价增殖率，采用AnnexinⅤFITC／PI双染流式细胞术检测各组转染48 h后的细胞凋亡率，CCK8法检测各组对吉西他滨的半数抑制浓度（IC50）。利用生物信息学数据库miRBase预测miR216的靶基因，利用cytoscape 351及其插件CluGO将其进行Gene Oncology（GO）功能注释。
结果BxPC3细胞中miR216表达量为3.010±0.901，高于CFPAC1细胞的1.049±0.074（P＜0.05）；对照组、mimics组和inhibitor组的miR-216表达量依次为1.130±0.145、4.843±0.782和0256±0.145，差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组比较，mimics组的细胞增殖水平升高而凋亡率降低，inhibitor组的增殖水平降低而凋亡率升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组、mimics组和inhibitor组的IC50值为（2.134±0.591）μg／ml、（4.518±0.862）μg／ml和（0.481±0.073）μg／ml，BxPC-3细胞转染inhibitor 后对吉西他滨的耐药性降低，转染mimics后对吉西他滨的耐药性增强（P＜0.05）。miR216的预测靶基因共有138个，GO功能主要富集于与肿瘤发生发展相关的细胞增殖、凋亡与侵袭迁移过程。结论 miR-216在胰腺癌耐药细胞株中表达上调且可以诱导胰腺癌细胞增殖，暗示其可以发挥类似促癌基因的作用且参与吉西他滨耐药过程，有可能成为胰腺癌早期诊断和新型生物治疗的靶点。

目的 探讨粪便DNA中联合分泌型卷曲相关蛋白1（SFRP1）及胞裂蛋白9（SEPT9）基因甲基化检测对老年性结直肠癌（CRC）早期诊断的临床价值。方法 选取我院从2016年1月至2016年9月确诊的35例年龄＞60岁CRC患者为研究组，选取同期35例＞60岁正常体检者为对照组。提取CRC患者和正常体检者粪便DNA，采用甲基化特异性PCR（MSP）技术分别检测SFRP1及SEPT9基因的甲基化状态；比较CRC患者单基因和联合双基因甲基化检出率的差异，以及CRC患者联合双基因甲基化检出率与对照组的差异；分析CRC患者SFRP1或SEPT9基因甲基化与临床病理特征（如年龄、性别、肿瘤位置）的关系。
结果 CRC患者粪便DNA中SFRP1及SEPT9基因甲基化检出率分别为45.71％（16／35）和51.43％（18／35），均显著高于对照组的8.57％（3／35）和14.29％（5／35），差异均有统计学意义（P＜0.01）；联合双基因检测结果显示， 82.86％（29／35）的CRC患者粪便DNA中至少存在一个基因的甲基化，显著高于单基因检出率（P＜001），亦高于对照组的17.14％（6／35），差异有统计学意义（P＜001）。CRC患者SFRP1或SEPT9基因甲基化与年龄、性别、肿瘤位置均无关（P＞0.05）。结论 粪便DNA中联合SFRP1及SEPT9基因甲基化检测比单基因检测更加敏感，对老年性CRC早期诊断具有重要的应用价值。

目的 探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者接受地西他滨（DAC）治疗前后程序性死亡因子1／程序性死亡因子1配体（PD-1／PD-L1）的变化。方法 收集2016年1月至2017年1月初治MDS中符合WHO 2008分型WPSS预后分层中危组及高危组并接受DAC（20 mg／m2 d1～d5，21～28天为1个周期，治疗2个周期）治疗的18例患者，同时以5例非恶性血液病患者为对照。于DAC治疗前后收集外周血和骨髓细胞。流式细胞术（FCM）检测DAC治疗前后外周血CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞的PD1和骨髓单核细胞PDL1的变化；QPCR检测DAC治疗前后外周血及骨髓单个核细胞PD-1 mRNA、PD-L1 mRNA相对表达量的变化；比较化疗缓解组（n=5）和未缓解组（n=13）PD1／PDL1的表达水平。结果 FCM检测显示，DAC治疗后，中危组CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞PD1和骨髓单个核细胞的PDL1比例分别为（11.43±1.88）％、（11.46±1.60）％和（16.59±0.72）％，高危组分别为（16.36±3.71）％、（1659±381）％和（1869±160）％，均高于治疗前和对照组（P＜0.05）；未缓解组CD3+CD4+T、CD3+CD8+T淋巴细胞PD1和骨髓单个核细胞上PDL1的比例分别为（18.51±262）％和（19.03±2.18）％和（19.22±1.40）％，高于缓解组（P＜0.05）。QPCR检测显示，DAC治疗后，中危组外周血单个核细胞PD1 mRNA和骨髓单个核细胞PDL1 mRNA的相对表达量为632±337和288±172，高危组分别为12.55±6.27和7.47±4.90，均高于治疗前（P＜0.05）。MDS未缓解组外周血PD1 mRNA和骨髓单个核细胞PDL1 mRNA的相对表达为16.28±4.64和9.16±5.40，高于缓解组（P＜0.05）。结论 DAC治疗后中、高危MDS患者的外周血、骨髓中PD-1／PD-L1表达明显上升，尤其是未缓解组，PD-1／PD-L1高表达可能是介导DAC耐药的原因之一。

目的 探讨肺腺癌组织中层粘连蛋白5（LN-5）表达及其与人表皮生长因子受体（EGFR）基因突变关系。方法 收集2015年1月至2015年12月57例肺腺癌及其配对癌旁组织标本，采用免疫组化SP法检测LN5蛋白表达，同时通过液相芯片技术检测EGFR基因突变状态，分析LN5表达与肺腺癌临床病理特征的关系以及与EGFR基因突变的相关性。
结果肺腺癌组织中LN5蛋白阳性表达率为21.1％（12／57），癌旁组织中为1.7％（1／57），差异有统计学意义（P＜0.05）。EGFR敏感突变（E19+E21）的发生率为43.9％（25／57），EGFR非敏感突变（野生型+E20）的发生率为56.1％（32／57）。LN-5蛋白表达与淋巴结转移和EGFR突变有关（P＜0.05），与TNM分期无关（P＞0.05）。LN5表达与EGFR突变呈负相关（r=-0.283，P＜0.05）。结论 LN5在肺腺癌组织中的表达升高，且其表达与EGFR突变状态具有相关性。

目的 探讨p16INK4a蛋白在多种人恶性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法 收集2014年至2015年手术切除的肿瘤标本642例。免疫组化染色检测并分析p16INK4在肿瘤组织中的表达。
结果642例肿瘤样本中良性肿瘤120例、恶性肿瘤522例。免疫组化检测p16INK4a在恶性肿瘤组织中表达阴性（-）、弱阳性（+）、中等阳性（++）和强阳性（+++）表达率分别为17.43％（91／522）、11.11％（58／522）、19.16％（100／522）和5230％（273／522），而在良性病变中表达率分别为34.17％（41／120）、23.33％（28／120）、26.67％（32／120）和1583％（19／120），差异具有统计学意义（P＜0.05）。在不同组织来源的肿瘤中p16INK4a蛋白阳性表达率也并不相同（P＜0.05）。分别以阳性免疫组化染色“++”和“+++”作为p16INK4A阳性表达界值，则p16INK4A 蛋白作为恶性肿瘤分子标志的灵敏度、特异度和阳性预测值分别为71.46％、57.50％、87.97％和52.30％、84.17％和93.49％。结论 p16INK4A 代偿性高表达是人恶性肿瘤特异性的免疫表型，可作为恶性肿瘤诊断、鉴别诊断和分子分型的分子标志。

目的 探讨晚期十二指肠癌患者一线化疗方案的疗效与安全性以及影响预后的因素。方法 回顾分析本院2008年6月至2016年1月收治的晚期十二指肠癌患者40例，9例未接受化疗，31例接受化疗，其中GEMOX方案13例、FOLFOX方案13例、卡培他滨单药2例和吉西他滨单药3例。采用RECIST 1.1版与NCICTC 4.0版标准评价化疗的近期疗效和不良反应。生存分析采用KaplanMeier法并行Logrank检验，多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 31例化疗患者均可评价疗效和不良反应，共完成化疗146个周期，中位化疗4个周期（2～12个周期）。GEMOX方案组获PR 1例、SD 10例、PD 2例，疾病控制率（DCR）为84.6％；FOLFOX方案组获SD 6例、PD 7例，DCR为46.2％；单药组：卡培他滨获SD 2例，吉西他滨获SD 1例、PD 2例，DCR为60.0％。31例化疗患者的中位生存期（OS）为15.7个月，9例未化疗患者的中位OS为4.4个月，差异有统计学意义（P＜0.001）。GEMOX方案组的中位OS为279个月，FOLFOX方案组为152个月，单药组为152个月，差异无统计学意义（P=0.656）。GEMOX方案组的中位无进展生存期（PFS）为7.8个月，FOLFOX方案组为4.0个月，单药组为5.1个月，差异无统计学意义（P=0.053）。常见不良反应多为1～2级，主要为白细胞减少、中性粒细胞减少、贫血、乏力及恶心等。单因素分析显示，浸润深度、分化程度、是否肝转移及是否化疗与晚期十二指肠癌的预后有关（P＜0.05）。Cox多因素分析显示，分化程度、是否肝转移及是否化疗是影响晚期十二指肠癌患者预后的独立因素。结论 GEMOX方案、FOLFOX方案、卡培他滨单药及吉西他滨单药一线化疗均对晚期十二指肠癌有效，且耐受性良好；其中GEMOX方案可能有更好的生存获益。分化程度、是否肝转移及是否化疗可能是影响晚期十二指肠癌患者的预后因素，临床上可作参考。

目的 评价替吉奥联合奥沙利铂（SOX）一线治疗转移性结直肠癌（mCRC）的有效性和安全性。方法 通过The Cochrane Library、PubMed、EMBASE和MEDLINE、中国知网（CNKI）、万方数据库等检索SOX方案一线治疗mCRC的多中心随机对照试验（RCT），用Rev Man 53版软件进行Meta分析。结果 共纳入5项临床多中心RCT，合计1382例mCRC患者。Meta分析结果显示，与奥沙利铂联合其他氟尿嘧啶类化疗药物比较，SOX方案在无进展生存期（HR=0.90，95％CI：0.80～1.02，P=0.10）、总生存期（HR=1.14，95％CI：0.98～1.31，P=0.08）、客观缓解率（RR=1.12，95％CI：0.87～1.43，P=0.38）、疾病控制率（RR=104，95％CI：0.98～110，P=0.24）的差异均无统计学意义。3～4 级不良反应：SOX方案组的白细胞减少发生率低于奥沙利铂联合其他氟尿嘧啶类药物（P＜0.05），而口腔黏膜反应、厌食、腹泻的发生率高于奥沙利铂联合其他氟尿嘧啶类药物（P＜0.05），两种方案在中性粒细胞减少、血小板减少、贫血、恶心、呕吐、乏力不良反应的发生率方面差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 OX一线治疗晚期结直肠癌的疗效与奥沙利铂联合其他氟尿嘧啶类药物的疗效相似，不良反应不同，替吉奥有可能成为除卡培他滨外口服氟尿嘧啶类一线治疗晚期结直肠癌的另一种选择。

目的 探讨阿帕替尼治疗胃癌和食管胃结合部腺癌伴肝转移患者的临床疗效及安全性。方法 收集2011年3月至2017年2月病理组织学确诊为胃癌或食管胃结合部腺癌伴肝转移患者42例，其中18例初治患者，24例复发难治患者。阿帕替尼口服剂量为250～850 mg，同时根据患者体能状态及不良反应给予相应剂量调整；联合化疗方案包括单药替吉奥、XELOX、SOX方案和经导管肝动脉及胃动脉化疗栓塞（TACE），采用 RECIST 11版标准评价近期疗效，NCICTCAE 4.0版标准评价不良反应，分析临床疗效与临床病理特征的关系，随访预后并采用Cox回归模型进行多因素生存分析。
结果阿帕替尼联合化疗组的中位化疗周期数为4个（2～6个），中位TACE次数为3次（1～3次）；其中PR 3例、SD 22例和PD 17例，有效率（RR）为7.14％，疾病控制率（DCR）为59.52％；中位生存期（OS）为7.0个月，中位无进展生存期（PFS）为2.0个月。患者性别、年龄、原发灶部位、是否行胃切除术、TACE、联合化疗和阿帕替尼不同初始剂量均与RR和DCR无关（P＞0.05）。单因素及多因素分析未发现与PFS相关的独立预后因素，是否联合化疗是影响OS的独立预后因素，其中阿帕替尼单药组较联合化疗组的OS差（HR=9.376，95%CI：2.178～40.361，P＜0.05）。不良反应包括白细胞减少、贫血、血小板减少、手足综合征、高血压、乏力及腹泻，多为1～2级，发生率低，可耐受。结论 阿帕替尼联合化疗治疗胃癌和食管胃结合部腺癌伴肝转移患者临床疗效确切，可明显延长该部分患者生存时间。

黑色素瘤是一种恶性的黑色素细胞肿瘤，我国黑色素瘤的发病率逐年攀升，而晚期黑色素瘤在过去几十年里一直没有有效的治疗方法，放疗、化疗及传统免疫治疗效果均不理想，患者预后极差。近年来，随着靶向药物（BRAF抑制剂）在晚期黑色素瘤的治疗上取得突破性进展，为晚期黑色素瘤内科治疗开启了新的篇章。本文通过对国内外具有代表性的临床试验结果的分析，就目前BRAF抑制剂用于治疗晚期黑色素瘤的研究进展作一综述，并初步探讨BRAF抑制剂在晚期黑色素瘤患者中的全程管理问题。

目前多项研究表明不同的环状RNA（circRNA）作为特殊的非编码RNA可以通过与特定的miRNA结合发挥海绵活性，并因此抑制miRNA功能，从而影响相关通路的进行，对特定肿瘤的发生发展产生影响。本文通过收集已有实验研究，对内源性circRNA海绵的生物发生、性质和功能进行总结，并对circRNA海绵与人类肿瘤发生发展的影响作一综述。

人源性肿瘤组织异种移植（PDTX）模型是通过将患者新鲜的肿瘤组织植入免疫缺陷小鼠，依靠小鼠提供的微环境生长。此模型保留了原代肿瘤的病理生理特性、组织学和表型特征，维持了肿瘤细胞的基质和干细胞组成，可代替患者进行临床前试验研究，以便找到更加真实可靠的抗癌策略。消化系统肿瘤是发病率和死亡率极高的疾病，目前已有多项国内外实验开发了消化系统PDTX模型并用于相应肿瘤的研究。本文就PDTX模型在消化系统肿瘤研究中的最新应用成果进行综述，并讨论和展望未来肿瘤治疗的发展方向。