目的 探讨转录水平基因沉默(TGS)技术和转录后水平基因沉默(PTGS)技术对肝素酶(HPA)基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法 从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA(siRNA),并转染肝癌细胞SMMC-7721;实时半定量PCR和Western blotting检测TGS和PTGS siRNA转染后48、72和96h HPA的表达,并设空白组作为对照;Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果 TGS和PTGS两种技术在转染48h后,从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达;转染后72h,PTGS组HPA恢复表达,而TGS组仍保持沉默;转染后96h,两组HPA均恢复表达。Transwell小室实验表明,TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少,TGS组效果更明显。结论 TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术,并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。
王晓桃,刘 玲,唐爱林,何玉婵
谢 丽1,尹震宇2,魏 嘉1,禹立霞1,钱晓萍1,刘宝瑞1
章月安,李小平,刘一胜,朱正奎,陈柚君,吴其琛,陈 婺,鲍 方
李 嵘,秦叔逵,刘秀峰,龚新雷,华海清,王 琳,陈映霞
贺艳阳,李 恩,周武涛,崔丙周
马守东1,胡万宁2,孙国贵1,李海丽1
陆 萌,吴苏稼,施 鑫,周光新,黎承军,赵建宁
杨志英,郑 浩,张 琦,刘 蕾,周伟利
邓秀文 综述,邹 文 审校
高英杰,杨 娟,张 超,韩竞春
江文洋,康敢军,谢颂平,黄 杰
张 琦1,章亚成2,季建敏2,沈 群2